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Introduzione alla fotografia microscopica

Michael Peres adora fotografare i piccoli dettagli del nostro mondo naturale. Professore di comunicazioni fotografiche biomediche al Rochester Institute of Technology, Peres è specializzato nell'acquisizione di questi intricati dettagli fotografando con un microscopio. Qui ci spiega come fa.

Mi sono interessato a fotografare piccole cose oltre 40 anni fa mentre studiavo medicina all'università. Sono stato esposto a questo mondo affascinante e invisibile mentre imparavo a delineare il tessuto muscolare dal tessuto connettivo usando un microscopio ottico. Sono stato attratto da ogni nuova materia che mi è stato chiesto di studiare e mi stupisce ancora come sono organizzate le cose. Amo fotografare fiocchi di neve, fiori e altri oggetti naturali. Ho iniziato a condividere il mio lavoro su Instagram nel marzo 2014 e sono rimasta affascinata dai follower di tutto il mondo che sono attratti dalle mie immagini.

Trovare un soggetto per la fotografia microscopica

Trovare un buon soggetto inizia con la curiosità del mondo. Trovo che sia davvero importante avere una mentalità aperta sui potenziali campioni. L'altro giorno, mentre passeggiava con il mio cane, è tornato a casa carico di bave. Dopo averne rimosso il maggior numero possibile, ho deciso di esaminarne uno al microscopio. Era solo un'erbaccia, ma al microscopio è diventata elegante e complessa.

L'individuazione e la gestione di piccoli oggetti è una parte importante del successo del processo. I campioni danneggiati o quelli con artefatti avranno una presentazione visiva diversa rispetto a campioni eccellenti ed è importante non lasciare che il danno diventi il ​​fulcro della fotografia. Trovare un campione senza imperfezioni è la prima priorità per il tipo di foto che voglio realizzare. Questo non vuol dire che i soggetti delle mie fotografie siano perfetti, non lo sono.

Ci sono due cose diverse a cui sto pensando quando preparo un campione fotografare:dissezione e isolamento, quale di questi ha la precedenza dipende dal soggetto e dal suo ingrandimento. Quando fotografo i fiori, in genere uso le forbici da dissezione per rimuovere i petali per migliorare la visibilità dei suoi elementi strutturali. Quando fotografo organismi acquatici, cerco di isolarli in una goccia d'acqua sotto un vetro di copertura. Meno è sempre di più in questo caso. Ogni soggetto presenta problemi unici e richiede metodi diversi per rendere il campione sufficientemente piccolo, sufficientemente piatto o sufficientemente sottile da poter essere fotografato.

Acquisto anche vetrini biologici preparati come sezioni trasversali di piante o tessuti animali:è molto difficile preparare questo tipo di vetrini senza attrezzature di precisione. Wards Natural Science e Carolina Biological Supply Company vendono migliaia di soggetti preparati per l'esame microscopico.

Attrezzatura necessaria per creare un'immagine microscopica

Quando si riprendono immagini microscopiche, i miei componenti fondamentali sono i microscopi, una luce in fibra ottica, un corpo macchina DSLR, un obiettivo macro, tubi di prolunga, soffietti e un treppiede. Quando fotografo fiocchi di neve, fiori o altri soggetti che si trovano in natura, mi trovo spesso nel mio garage e tengo una scorta pronta di vetrini da microscopio puliti e un pezzo di tessuto di velluto nero da usare come sfondo. Ho anche molti aghi, piccoli pennelli e bastoncini con punta di cotone che uso per spostare i campioni e riordinare l'area circostante.

Di solito uso un microscopio ottico composto per le mie fotografie. I microscopi ottici sono abbastanza comuni e facili da trovare. Possono essere costosi o relativamente economici, un microscopio per studenti potrebbe costare fino a $ 250 mentre un microscopio di fascia alta potrebbe costare $ 200.000. Un microscopio usato di fascia bassa abbastanza buono può essere trovato per $ 5000.

I microscopi ingrandiscono i soggetti utilizzando due obiettivi. Il primo stadio di ingrandimento è prodotto dalla lente dell'obiettivo e il secondo stadio di ingrandimento è l'oculare. Un obiettivo ha una lunghezza focale proprio come gli obiettivi fotografici tradizionali utilizzati su una fotocamera DSLR. Le distanze di lavoro sono molto piccole per questo tipo di fotografia:una gamma tipica di ingrandimenti dell'obiettivo per un microscopio ottico potrebbe includere 2x, 4x, 10x, 20x, 40, 60x o 100x. Scelgo la mia lente sul microscopio in base ai requisiti di ingrandimento del campione. L'ingrandimento influenza la profondità di campo dell'immagine, quindi un campione grande e spesso (0,5 cm) beneficia di un basso ingrandimento, mentre i soggetti molto piatti necessitano di un ingrandimento maggiore.

Quando si utilizza un microscopio ottico è possibile scattare foto utilizzando uno smartphone o una fotocamera con obiettivo fisso ed è un ottimo punto di partenza. Con queste fotocamere l'obiettivo deve essere posizionato nel punto dell'occhio del microscopio, che può essere posizionato tenendo un pezzo di carta a circa 1 cm dall'oculare del microscopio. Sulla carta sarà visibile un puntino di luce molto piccolo, questo è il punto dell'occhio e dove dovrebbe essere diretta la lente. Un piccolo treppiede può essere utile per tenere la fotocamera in posizione. Il nastro di Gaffer è spesso il mio migliore amico come fotografo tecnico perché mi consente di proteggere il telefono da altri elementi del sistema durante i miei scatti.

Sebbene l'utilizzo di uno smartphone o di una fotocamera con obiettivo fisso funzioni, mi piace usare un Nikon D300s o D800 con l'obiettivo rimosso e il corpo appeso sopra l'oculare del microscopio utilizzando un supporto per fotocopie verticale o un treppiede. Uso anche tubi di prolunga o soffietti sulla mia fotocamera per gestire la luce ambientale, che può creare bagliori e ridurre il contrasto. Con una DSLR devi allineare il sensore della fotocamera sul piccolo punto di luce dal punto dell'occhio. Per creare un'immagine microscopica allineerò il sensore della mia fotocamera sopra l'oculare a una distanza in cui il cerchio di illuminazione prodotto dal microscopio è abbastanza grande da coprire il sensore senza vedere il cerchio. Verificare che il punto luce abbia coperto il sensore controllando lo schermo LCD della fotocamera. Prestare attenzione durante l'installazione:è molto importante essere consapevoli della distanza tra l'oculare e il sensore non protetto.

Illuminare il tuo soggetto microscopico

Utilizzo principalmente la luce incorporata del microscopio e la integro con l'illuminazione a fibra ottica. Quando guardo un campione per la prima volta, immagino che aspetto abbia l'immagine e lavoro per arrivarci. Apporto molti piccoli aggiustamenti alla posizione della luce, il che fa una grande differenza nei risultati. Alcuni dei soggetti che sto fotografando potrebbero essere di uno o due millimetri o più piccoli. Quanta luce di riempimento è necessaria o cosa rende l'angolo della luce giusto sono le decisioni che prendo prima di scattare. La mia strategia si basa in gran parte su come funziona la luce con il campione stesso. I tre stili di illuminazione che uso più regolarmente sono Kohler, Darkfield e Polarized, continua a leggere per ulteriori informazioni su ciascuno di essi.

Come utilizzo l'illuminazione Kohler durante la ripresa di soggetti microscopici

Quando fotografo una "sezione sottile" preparata, cerco di creare una retroilluminazione neutra e uniforme chiamata illuminazione Kohler. Questo stile di illuminazione consente al microscopista di massimizzare il contrasto e la risoluzione dell'immagine e la produzione di un'illuminazione uniforme e uniforme dietro il campione. Continuo a usarlo perché crea trattamenti simili a ritratti delle cose che fotografo.

Come utilizzo l'illuminazione Darkfield durante la ripresa di soggetti microscopici

Utilizzerò anche il campo scuro, che fa brillare un oggetto su uno sfondo nero , creando un aspetto di tipo astronomico. L'illuminazione del campo scuro proviene da dietro un soggetto trasparente e viene proiettata attraverso il campione ad angoli obliqui. Questo stile di illuminazione produce un aspetto molto drammatico, lo svantaggio è che tutto sarà illuminato quando si utilizza il campo scuro, comprese le cose che non si desidera che vengano accese, come sporco, graffi o bolle d'aria.

Come utilizzo l'illuminazione polarizzata durante la ripresa di soggetti microscopici

Uso la luce polarizzata quando fotografo campioni che mostrano birifrangenza, che è un termine tecnico che descrive come un campione può o meno "mostrare" colori simili a arcobaleno quando inserito in un microscopio a luce polarizzata. I campioni che includono peli, fibre, sostanze chimiche, minerali, alcune ali di insetti e molti oggetti sintetici sembreranno fatti di arcobaleni quando esaminati utilizzando la luce polarizzata. La luce polarizzata viene utilizzata per rivelare informazioni interne a questi campioni che altrimenti potrebbero non essere visibili.

Messa a fuoco durante lo scatto di fotografie microscopiche

Per mettere a fuoco l'immagine ingrandita con la mia DSLR, rimuovo l'obiettivo della fotocamera e proietto l'immagine direttamente nel corpo della fotocamera della DSLR. I controlli di messa a fuoco del microscopio vengono quindi utilizzati per mettere a fuoco l'immagine nel mirino della fotocamera. Creare un'immagine nitida può essere difficile. Il mirino della DSLR non raccoglie la stessa quantità di dettagli fini che il microscopio può creare, quindi le cose spesso sembrano un po' più ruvide nel mirino che finiscono per guardare nei file RAW. Ci vuole un po' di pratica per essere in grado di prevedere come apparirà l'immagine una volta registrata.

È anche possibile mettere a fuoco utilizzando il live view. In una stanza poco illuminata, questo può essere molto utile per osservare la definizione critica dell'immagine all'interno di un campione. Se stai utilizzando uno smartphone che è stato posizionato con cura sopra l'oculare, vorrai comunque mettere a fuoco l'immagine visualizzata sul display del telefono manipolando la manopola di messa a fuoco del microscopio.

Elaborazione delle tue immagini microscopiche

Una delle maggiori sfide in questo tipo di lavoro è creare contrasto e delineazione strutturale delle parti interne e cerco di fare il duro lavoro durante le riprese. Quando fotografo, lavoro lentamente per ottenere un risultato interessante usando obiettivi e luce.

Sono molto cauto sull'eccessiva elaborazione delle immagini. Nella post-elaborazione sono più interessato alla gestione del tono, all'impostazione di punti bianchi o neri e alla rimozione dello sporco irrilevante. Scatto in RAW, apro il file RAW in Photoshop e poi elaboro i dettagli strutturali che sono presenti nel file, ma spesso poco visibili. In questa fase eseguo anche una piccola quantità di chiarificazione o affilatura. Dopo aver apportato lievi modifiche ai toni in Photoshop, renderò più nitido il file utilizzando il filtro passa banda alta.

Penso che sia importante che le immagini non siano completamente impeccabili. Niente è perfetto nella vita e penso che se le immagini sono troppo perfette potrebbero sembrare generate dal computer. Il mio obiettivo per questo lavoro è realizzare fotografie scientifiche che operino in ambienti non scientifici e consentire alle persone di imparare qualcosa di nuovo sul mondo in cui vivono. Le mie foto presentano cose reali e anche la vita ha imperfezioni e aree sfocate.


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